Синтетический аналог лей-энкефалина предотвращает активацию нейтрофилов под действием бактериальных компонентов
Аннотация
Актуальность. Активация нейтрофилов – обязательный этап и чувствительный маркер системного воспалительного ответа. С развитием этого состояния сопряжено возникновение полиорганной недостаточности – основного показания для пребывания пациентов в отделении реанимации. Поиск препаратов, способных предотвратить развитие системного воспалительного ответа и снизить летальность, остается актуальной задачей анестезиологииреаниматологии.
Цель – изучить противовоспалительное действие синтетического аналога лей-энкефалина (препарат даларгин) на нейтрофилах человека in vitro.
Материал и методы. Исследование проводилось на выделенных из крови 5 здоровых доноров нейтрофилах, часть из которых активировали с помощью 10 мкM формил-Мет-Лей-Про (fMLP) и 100 нг/мл липополисахарида (ЛПС) и затем оценивали их активность с помощью флуоресцентных антител к маркерам дегрануляции CD11b и CD66b. Интактные и активированные нейтрофилы обрабатывали раствором даларгина в концентрациях 50 и 100 мкг/мл.
Результаты. Даларгин в концентрации 100 мкг/мл в 5,5 раза (р=0,008) снижает уровень экспрессии молекул CD11b на поверхности интактных нейтрофилов, а ЛПС в дозе 100 нг/мл, напротив, увеличивает экспрессию тех же молекул на 46% (р=0,08). Добавление даларгина в концентрации 50 мкг/мл к нейтрофилам, активированным ЛПС, уменьшает экспрессию молекул CD11b (р=0,016). Добавление даларгина в концентрациях 50 мкг/мл к активированным fMLP нейтрофилам значимо (р=0,008) уменьшает экспрессию молекул CD11b и возвращает ее практически к уровню контроля. Даларгина, добавленный в концентрации 100 мкг/мл к нейтрофилам, активированным fMLP в дозе 10 мкМ, уменьшает экспрессию CD11b на их поверхности до уровня ниже контроля на 23% (р=0,08).
Заключение. Даларгин в исследованных концентрациях оказывает противовоспалительное действие как на интактные, так и на предактивированные бактериальными компонентами нейтрофилы, ингибируя процесс активации и дегрануляции дозозависимым образом.
Об авторах
О. А. ГребенчиковРоссия
Гребенчиков Олег Александрович - доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник отделения реаниматологии МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского; заведующий лабораторией органопротекции при критических состояниях, Научно-исследовательский институт общей реаниматологии имени В.А. Неговского.
129110, Москва, ул. Щепкина, 61/2, Тел.: +7 (495) 631 74 82; 107031, Москва, ул. Петровка, 25/2
А. К. Шабанов
Россия
Шабанов Аслан Курбанович - доктор медицинских наук, главный научный сотрудник лаборатории клинической патофизиологии критических состояний, Научно-исследовательский институт общей реаниматологии имени В.А. Неговского; старший научный сотрудник отделения реанимации и интенсивной терапии для экстренных больных НИИСП им. Н.В. Склифосовского.
107031, Москва, ул. Петровка, 25/2; 129090, Москва, Б. Сухаревская пл., 3/21
А. А. Косов
Россия
Косов Артем Александрович - младший научный сотрудник хирургического отделения трансплантологии и диализа.
129110, Москва, ул. Щепкина, 61/2
Ю. В. Скрипкин
Россия
Скрипкин Юрий Вольдемарович - кандидат медицинских наук, заведующий отделением реанимации и интенсивной терапии.
129110, Москва, ул. Щепкина, 61/2
А. Г. Яворовский
Россия
Яворовский Андрей Георгиевич - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой анестезиологии-реанимации.
119991, Москва, ул. Трубецкая, 8/2
В. В. Лихванцев
Россия
Лихванцев Валерий Владимирович - доктор медицинских наук, профессор, руководитель отделения реанимации и интенсивной терапии.
129110, Москва, ул. Щепкина, 61/2
Список литературы
1. Balk RA. Systemic inflammatory response syndrome (SIRS): where did it come from and is it still relevant today? Virulence. 2014;5(1):20–6. doi: 10.4161/viru.27135.
2. Qin L, Wu X, Block ML, Liu Y, Breese GR, Hong JS, Knapp DJ, Crews FT. Systemic LPS causes chronic neuroinflammation and progressive neurodegeneration. Glia. 2007;55(5):453–62. doi: 10.1002/glia.20467.
3. Alexander JJ, Jacob A, Cunningham P, Hensley L, Quigg RJ. TNF is a key mediator of septic encephalopathy acting through its receptor, TNF receptor-1. Neurochem Int. 2008;52(3): 447–56. doi: 10.1016/j.neuint.2007.08.006.
4. Jaffer U, Wade RG, Gourlay T. Cytokines in the systemic inflammatory response syndrome: a review. HSR Proc Intensive Care Cardiovasc Anesth. 2010;2(3):161–75.
5. Parkos CA, Colgan SP, Madara JL. Interactions of neutrophils with epithelial cells: lessons from the intestine. J Am Soc Nephrol. 1994;5(2):138–52.
6. Schmidt T, Zündorf J, Grüger T, Brandenburg K, Reiners AL, Zinserling J, Schnitzler N. CD66b overexpression and homotypic aggregation of human peripheral blood neutrophils after activation by a gram-positive stimulus. J Leukoc Biol. 2012;91(5):791–802. doi: 10.1189/jlb.0911483.
7. Lilius EM, Nuutila J. Bacterial infections, DNA virus infections, and RNA virus infections manifest differently in neutrophil receptor expression. ScientificWorldJournal. 2012;2012:527347. doi: 10.1100/2012/527347.
8. Lioté F, Boval-Boizard B, Weill D, Kuntz D, Wautier JL. Blood monocyte activation in rheumatoid arthritis: increased monocyte adhesiveness, integrin expression, and cytokine release. Clin Exp Immunol. 1996;106(1):13–9. doi: 10.1046/j.1365-2249.1996.d01-820.x.
9. Mastej K, Adamiec R. Neutrophil surface expression of CD11b and CD62L in diabetic microangiopathy. Acta Diabetol. 2008;45(3): 183–90. doi: 10.1007/s00592-008-0040-0.
10. Weirich E, Rabin RL, Maldonado Y, Benitz W, Modler S, Herzenberg LA, Herzenberg LA. Neutrophil CD11b expression as a diagnostic marker for early-onset neonatal infection. J Pediatr. 1998;132(3 Pt 1):445–51. doi: 10.1016/S0022-3476(98)70018-6.
11. Muller Kobold AC, Tulleken JE, Zijlstra JG, Sluiter W, Hermans J, Kallenberg CG, Tervaert JW. Leukocyte activation in sepsis; correlations with disease state and mortality. Intensive Care Med. 2000;26(7):883–92.
12. Boomer JS, Green JM, Hotchkiss RS. The changing immune system in sepsis: is individualized immuno-modulatory therapy the answer? Virulence. 2014;5(1):45–56. doi: 10.4161/viru.26516.
13. Ball L, Costantino F, Pelosi P. Postoperative complications of patients undergoing cardiac surgery. Curr Opin Crit Care. 2016;22(4):386– 92. doi: 10.1097/MCC.0000000000000319.
14. Лихванцев ВВ, Гребенчиков ОА, Борисов КЮ, Шайбакова ВЛ, Шапошников АА, Черпаков РА, Шмелева ЕВ. Механизмы фармакологического прекондиционирования мозга и сравнительная эффективность препаратов – ингибиторов гликоген-синтетазы-киназы – 3 бета прямого и непрямого действия (экспериментальное исследование). Общая реаниматология. 2012;8(6):37. doi: 10.15360/1813-9779-2012-6-37.
15. Лихванцев ВВ, Гребенчиков ОА, Шапошников АА, Борисов КЮ, Черпаков РА, Шульгина НМ. Фармакологическое прекондиционирование: роль опиоидных пептидов. Общая реаниматология. 2012;8(3):51. doi: 10.15360/1813-9779-2012-3-51.
16. Schultz JJ, Hsu AK, Gross GJ. Ischemic preconditioning and morphine-induced cardioprotection involve the delta (delta)-opioid receptor in the intact rat heart. J Mol Cell Cardiol. 1997;29(8):2187–95. doi: 10.1006/jmcc.1997.0454.
17. Vorobjeva N, Prikhodko A, Galkin I, Pletjushkina O, Zinovkin R, Sud'ina G, Chernyak B, Pinegin B. Mitochondrial reactive oxygen species are involved in chemoattractant-induced oxidative burst and degranulation of human neutrophils in vitro. Eur J Cell Biol. 2017;96(3): 254–65. doi: 10.1016/j.ejcb.2017.03.003.
18. Гребенчиков ОА, Овезов АМ, Скрипкин ЮВ, Забелина ТС, Улиткина ОН, Луговой АВ, Приходько АС, Рыжков АЮ, Зиновкин РА. Синтетический аналог лей-энкефалина предотвращает развитие эндотелиальной дисфункции in vitro. Общая реаниматология. 2018;14(2):60–8. doi: 10.15360/1813-9779-2018-2-60-68.
19. Welters ID, Menzebach A, Goumon Y, Langefeld TW, Harbach H, Mühling J, Cadet P, Stefano GB. Morphine inhibits AP-1 activity and CD14 expression in leukocytes by a nitric oxide and opioid receptor-dependent mechanism. Eur J Anaesthesiol. 2007;24(11): 958–65. doi: 10.1017/S026502150700083X.
20. Szeto HH, Schiller PW, Zhao K, Luo G. Fluorescent dyes alter intracellular targeting and function of cell-penetrating tetrapeptides. FASEB J. 2005;19(1):118–20. doi: 10.1096/fj.04-1982fje.
21. Zhao K, Luo G, Zhao GM, Schiller PW, Szeto HH. Transcellular transport of a highly polar 3+ net charge opioid tetrapeptide. J Pharmacol Exp Ther. 2003;304(1):425–32. doi: 10.1124/jpet.102.040147.
Дополнительные файлы
|
1. Fig. 1. Neutrophil activation and expression of adhesion molecules CD11b (red triangle) and СD66b (green triangle) induced by an inflammatory stimulus | |
Тема | ||
Тип | Прочее | |
Посмотреть
(201KB)
|
Метаданные |
|
2. Table 1. CD11b expression levels (fluorescence units) on the surface of neutrophils under various stimuli | |
Тема | ||
Тип | Прочее | |
Посмотреть
(275KB)
|
Метаданные |
|
3. Table 2. CD66b expression levels (fluorescence units) on the surface of neutrophils under various stimuli | |
Тема | ||
Тип | Прочее | |
Посмотреть
(298KB)
|
Метаданные |
|
4. Fig. 2. Dalargin reduces the expression of degranulation marker CD11b in intact and lipopolysaccharide (LPS)- and chemotactic peptide fMet-Leu-Phe (fMLP)-activated human neutrophils | |
Тема | ||
Тип | Прочее | |
Посмотреть
(242KB)
|
Метаданные |
|
5. Fig. 3. Dalargin reduces the expression of degranulation marker CD66b in intact and lipopolysaccharide (LPS)- and chemotactic peptide fMet-Leu-Phe (fMLP)-activated human neutrophils | |
Тема | ||
Тип | Прочее | |
Посмотреть
(238KB)
|
Метаданные |
Для цитирования:
Гребенчиков О.А., Шабанов А.К., Косов А.А., Скрипкин Ю.В., Яворовский А.Г., Лихванцев В.В. Синтетический аналог лей-энкефалина предотвращает активацию нейтрофилов под действием бактериальных компонентов. Альманах клинической медицины. 2019;47(3):228-235. https://doi.org/10.18786/2072-0505-2019-47-026
For citation:
Grebenchikov O.A., Shabanov A.K., Kosov A.A., Skripkin Yu.V., Yavorovsky A.G., Likhvantsev V.V. Synthetic leu-enkefalin analogue prevents activation of neutrophils induced by a bacterial component. Almanac of Clinical Medicine. 2019;47(3):228-235. (In Russ.) https://doi.org/10.18786/2072-0505-2019-47-026