Preview

Альманах клинической медицины

Расширенный поиск

Синтетический аналог лей-энкефалина предотвращает активацию нейтрофилов под действием бактериальных компонентов

https://doi.org/10.18786/2072-0505-2019-47-026

Полный текст:

Аннотация

Актуальность. Активация нейтрофилов – обязательный этап и  чувствительный маркер системного воспалительного ответа. С развитием этого состояния сопряжено возникновение полиорганной недостаточности  – основного показания для пребывания пациентов в  отделении реанимации. Поиск препаратов, способных предотвратить развитие системного воспалительного ответа и снизить летальность, остается актуальной задачей анестезиологииреаниматологии.

Цель  – изучить противовоспалительное действие синтетического аналога лей-энкефалина (препарат даларгин) на нейтрофилах человека in vitro.

Материал и  методы. Исследование проводилось на выделенных из крови 5  здоровых доноров нейтрофилах, часть из которых активировали с  помощью 10 мкM формил-Мет-Лей-Про (fMLP) и 100 нг/мл липополисахарида (ЛПС) и затем оценивали их активность с  помощью флуоресцентных антител к  маркерам дегрануляции CD11b и  CD66b. Интактные и  активированные нейтрофилы обрабатывали раствором даларгина в  концентрациях 50 и 100 мкг/мл.

Результаты. Даларгин в концентрации 100 мкг/мл в 5,5 раза (р=0,008) снижает уровень экспрессии молекул CD11b на поверхности интактных нейтрофилов, а ЛПС в дозе 100 нг/мл, напротив, увеличивает экспрессию тех же молекул на 46% (р=0,08). Добавление даларгина в  концентрации 50  мкг/мл к  нейтрофилам, активированным ЛПС, уменьшает экспрессию молекул CD11b (р=0,016). Добавление даларгина в  концентрациях 50  мкг/мл к  активированным fMLP нейтрофилам значимо (р=0,008) уменьшает экспрессию молекул CD11b и  возвращает ее практически к  уровню контроля. Даларгина, добавленный в концентрации 100 мкг/мл к нейтрофилам, активированным fMLP в дозе 10 мкМ, уменьшает экспрессию CD11b на их поверхности до уровня ниже контроля на 23% (р=0,08).

Заключение. Даларгин в  исследованных концентрациях оказывает противовоспалительное действие как на интактные, так и на предактивированные бактериальными компонентами нейтрофилы, ингибируя процесс активации и дегрануляции дозозависимым образом. 

Об авторах

О. А. Гребенчиков
ГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского»; ФГБНУ «Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии»
Россия

д-р мед. наук, вед. науч. сотр. отделения реаниматологии, 129110, г. Москва, ул. Щепкина, 61/2;

заведующий лабораторией органопротекции при критических состояниях, 107031, г. Москва, ул. Петровка, 25/2 



А. К. Шабанов
ФГБНУ «Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии»; ГБУЗ г. Москвы «Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Москвы»
Россия

д-р мед. наук, гл. науч. сотр. лаборатории клинической патофизиологии критических состояний, 107031, г. Москва, ул. Петровка, 25/2;

ст. науч. сотр. отделения реанимации и интенсивной терапии для экстренных больных, 129090, г. Москва, Б. Сухаревская пл., 3/21



А. А. Косов
ГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского»
Россия

мл. науч. сотр. хирургического отделения трансплантологии и диализа,

129110, г. Москва, ул. Щепкина, 61/2



Ю. В. Скрипкин
ГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского»
Россия

канд. мед. наук, заведующий отделением реанимации и интенсивной терапии,

129110, г. Москва, ул. Щепкина, 61/2



А. Г. Яворовский
ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет)
Россия

д-р мед. наук, профессор, заведующий кафедрой анестезиологи и реанимации,

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, 8/2



В. В. Лихванцев
ГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского»
Россия

д-р мед. наук, профессор, руководитель отделения реанимации и интенсивной терапии,

129110, г. Москва, ул. Щепкина, 61/2



Список литературы

1. Balk RA. Systemic inflammatory response syndrome (SIRS): where did it come from and is it still relevant today? Virulence. 2014;5(1):20–6. doi: 10.4161/viru.27135.

2. Qin L, Wu X, Block ML, Liu Y, Breese GR, Hong JS, Knapp DJ, Crews FT. Systemic LPS causes chronic neuroinflammation and progressive neurodegeneration. Glia. 2007;55(5):453–62. doi: 10.1002/glia.20467.

3. Alexander JJ, Jacob A, Cunningham P, Hensley L, Quigg RJ. TNF is a key mediator of septic encephalopathy acting through its receptor, TNF receptor-1. Neurochem Int. 2008;52(3): 447–56. doi: 10.1016/j.neuint.2007.08.006.

4. Jaffer U, Wade RG, Gourlay T. Cytokines in the systemic inflammatory response syndrome: a review. HSR Proc Intensive Care Cardiovasc Anesth. 2010;2(3):161–75.

5. Parkos CA, Colgan SP, Madara JL. Interactions of neutrophils with epithelial cells: lessons from the intestine. J Am Soc Nephrol. 1994;5(2):138–52.

6. Schmidt T, Zündorf J, Grüger T, Brandenburg K, Reiners AL, Zinserling J, Schnitzler N. CD66b overexpression and homotypic aggregation of human peripheral blood neutrophils after activation by a gram-positive stimulus. J Leukoc Biol. 2012;91(5):791–802. doi: 10.1189/jlb.0911483.

7. Lilius EM, Nuutila J. Bacterial infections, DNA virus infections, and RNA virus infections manifest differently in neutrophil receptor expression. ScientificWorldJournal. 2012;2012:527347. doi: 10.1100/2012/527347.

8. Lioté F, Boval-Boizard B, Weill D, Kuntz D, Wautier JL. Blood monocyte activation in rheumatoid arthritis: increased monocyte adhesiveness, integrin expression, and cytokine release. Clin Exp Immunol. 1996;106(1):13–9. doi: 10.1046/j.1365-2249.1996.d01-820.x.

9. Mastej K, Adamiec R. Neutrophil surface expression of CD11b and CD62L in diabetic microangiopathy. Acta Diabetol. 2008;45(3): 183–90. doi: 10.1007/s00592-008-0040-0.

10. Weirich E, Rabin RL, Maldonado Y, Benitz W, Modler S, Herzenberg LA, Herzenberg LA. Neutrophil CD11b expression as a diagnostic marker for early-onset neonatal infection. J Pediatr. 1998;132(3 Pt 1):445–51. doi: 10.1016/S0022-3476(98)70018-6.

11. Muller Kobold AC, Tulleken JE, Zijlstra JG, Sluiter W, Hermans J, Kallenberg CG, Tervaert JW. Leukocyte activation in sepsis; correlations with disease state and mortality. Intensive Care Med. 2000;26(7):883–92.

12. Boomer JS, Green JM, Hotchkiss RS. The changing immune system in sepsis: is individualized immuno-modulatory therapy the answer? Virulence. 2014;5(1):45–56. doi: 10.4161/viru.26516.

13. Ball L, Costantino F, Pelosi P. Postoperative complications of patients undergoing cardiac surgery. Curr Opin Crit Care. 2016;22(4):386– 92. doi: 10.1097/MCC.0000000000000319.

14. Лихванцев ВВ, Гребенчиков ОА, Борисов КЮ, Шайбакова ВЛ, Шапошников АА, Черпаков РА, Шмелева ЕВ. Механизмы фармакологического прекондиционирования мозга и сравнительная эффективность препаратов – ингибиторов гликоген-синтетазы-киназы – 3 бета прямого и непрямого действия (экспериментальное исследование). Общая реаниматология. 2012;8(6):37. doi: 10.15360/1813-9779-2012-6-37.

15. Лихванцев ВВ, Гребенчиков ОА, Шапошников АА, Борисов КЮ, Черпаков РА, Шульгина НМ. Фармакологическое прекондиционирование: роль опиоидных пептидов. Общая реаниматология. 2012;8(3):51. doi: 10.15360/1813-9779-2012-3-51.

16. Schultz JJ, Hsu AK, Gross GJ. Ischemic preconditioning and morphine-induced cardioprotection involve the delta (delta)-opioid receptor in the intact rat heart. J Mol Cell Cardiol. 1997;29(8):2187–95. doi: 10.1006/jmcc.1997.0454.

17. Vorobjeva N, Prikhodko A, Galkin I, Pletjushkina O, Zinovkin R, Sud'ina G, Chernyak B, Pinegin B. Mitochondrial reactive oxygen species are involved in chemoattractant-induced oxidative burst and degranulation of human neutrophils in vitro. Eur J Cell Biol. 2017;96(3): 254–65. doi: 10.1016/j.ejcb.2017.03.003.

18. Гребенчиков ОА, Овезов АМ, Скрипкин ЮВ, Забелина ТС, Улиткина ОН, Луговой АВ, Приходько АС, Рыжков АЮ, Зиновкин РА. Синтетический аналог лей-энкефалина предотвращает развитие эндотелиальной дисфункции in vitro. Общая реаниматология. 2018;14(2):60–8. doi: 10.15360/1813-9779-2018-2-60-68.

19. Welters ID, Menzebach A, Goumon Y, Langefeld TW, Harbach H, Mühling J, Cadet P, Stefano GB. Morphine inhibits AP-1 activity and CD14 expression in leukocytes by a nitric oxide and opioid receptor-dependent mechanism. Eur J Anaesthesiol. 2007;24(11): 958–65. doi: 10.1017/S026502150700083X.

20. Szeto HH, Schiller PW, Zhao K, Luo G. Fluorescent dyes alter intracellular targeting and function of cell-penetrating tetrapeptides. FASEB J. 2005;19(1):118–20. doi: 10.1096/fj.04-1982fje.

21. Zhao K, Luo G, Zhao GM, Schiller PW, Szeto HH. Transcellular transport of a highly polar 3+ net charge opioid tetrapeptide. J Pharmacol Exp Ther. 2003;304(1):425–32. doi: 10.1124/jpet.102.040147.


Дополнительные файлы

1. Fig. 1. Neutrophil activation and expression of adhesion molecules CD11b and CD66b induced by an inflammatory stimulus
Тема
Тип Прочее
Посмотреть (201KB)    
Метаданные
2. Fig. 2. Dalargin reduces the expression of degranulation marker CD11b in intact and lipopolysaccharide- and chemotactic peptide fMet-Leu-Phe-activated human neutrophils
Тема
Тип Прочее
Посмотреть (242KB)    
Метаданные
3. Fig. 3. Dalargin reduces the expression of degranulation marker CD66b in intact and lipopolysaccharide- and chemotactic peptide fMet-Leu-Phe-activated human neutrophils
Тема
Тип Прочее
Посмотреть (238KB)    
Метаданные
4. Table 1. CD11b expression levels on the surface of neutrophils under various stimuli
Тема
Тип Прочее
Посмотреть (275KB)    
Метаданные
5. Table 2. CD66b expression levels on the surface of neutrophils under various stimuli
Тема
Тип Прочее
Посмотреть (298KB)    
Метаданные

Для цитирования:


Гребенчиков О.А., Шабанов А.К., Косов А.А., Скрипкин Ю.В., Яворовский А.Г., Лихванцев В.В. Синтетический аналог лей-энкефалина предотвращает активацию нейтрофилов под действием бактериальных компонентов. Альманах клинической медицины. 2019;47. https://doi.org/10.18786/2072-0505-2019-47-026

For citation:


Grebenchikov O.A., Shabanov A.K., Kosov A.A., Skripkin Y.V., Yavorovsky A.G., Likhvantsev V.V. Synthetic leu-enkefalin analogue prevents activation of neutrophils induced by a bacterial component. Almanac of Clinical Medicine. 2019;47. (In Russ.) https://doi.org/10.18786/2072-0505-2019-47-026

Просмотров: 40


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2072-0505 (Print)
ISSN 2587-9294 (Online)